IV CONGRESO VIRTUAL HISPANO AMERICANO DE ANATOMÍA PATOLÓGICA IV-CVHAP

CONTENIDO

 
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DISECCIÓN MOLECULAR DE LOS TUMORES NEUROECTODÉRMICOS PRIMITIVOS (PNETS) DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL: DELECIONES HOMOCIGÓTICAS A NIVEL DEL CROMOSOMA 10Q (GENES PTEN Y DMBT1) EN 42 PNETS SUPRA E INFRATENTORIALES.

Maria del Mar Inda, Javier Mercapide, Teresa Tuñón, Juan J. Burgos, José María Rivera, Javier Sáez Castresana.

Dep. de Genética, Universidad de Navarra. Pamplona; Servicio de Anatomía Patológica, Hospital de Navarra, Pamplona..  Departamento de Anatomía Patológica, Hospital de Cruces, Baracaldo, País Vasco, España. 

IV-CVHAP 2001 COMUNICACIÓN-E - 041

Fecha recepción: 14/02/2001
Fecha publicación: 13/04/2001
 Evaluación: Ver "Taller de Patología Molecular"

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RESUMEN
 
   INTRODUCCIÓN: Los genes recientemente descubiertos, PTEN y DMBT1 se encuentran situados en el cromosoma 10q. En concreto: PTEN en 10q23.3, y DMBT1 en 10q25.3-q26.1. Ambos son genes supresores de tumores que participan, entre otros, en la génesis de tumores cerebrales, como gliomas y tumores neuroectodermicos primitivos (PNETs). Los PNETs supratentoriales son similares morfológicamente a los infratentoriales (PNETs de tronco y meduloblastomas de cerebelo), pero muestran diferente comportamiento biológico, siendo, en general, los PNETs de cualquier localización más agresivos que los meduloblastomas cerebelosos. Ante la sospecha de que los PNETs supratentoriales y los meduloblastomas presenten diferencias genéticas específicas de grupo, que puedan ayudar a elegir un tratamiento más específico, hemos estudiado el patrón de deleciones homocigóticas de los genes PTEN y DMBT1 mediante PCR diferencial. 

   MATERIAL Y MÉTODO: El DNA sometido a estudio fue extraído de muestras incluidas en parafina correspondientes a 42 PNETs, de los cuales, 11 eran supratentoriales, y 31 infratentoriales (cerebelo). Mediante PCR diferencial se realizó el estudio de detección de deleciones homocigóticas en cada gen particular. 

   RESULTADOS: Se detectaron deleciones de PTEN en 6 (19%) meduloblastomas y en ningún PNET supratentorial, así como deleciones de DMBT1 en 2 (6%) meduloblastomas y otros 2 (18%) PNETs supratentoriales. 

   CONCLUSIÓN: Ante los resultados obtenidos parece que las deleciones de PTEN se asocian más frecuentemente a la génesis de meduloblastomas, mientras que las deleciones de DMBT1 se asocian al desarrollo de PNETs supratentoriales. Estos resultados se consideran preliminares y han de ser corroborados con series mayores de tumores y un análisis estadístico oportuno.

Palabras clave: patología pedíatrica | molecular | PNETs | DMBT1 | PCR | deleciones | 10q23.3 | 10q25.3-q26.1
   

IMÁGENES


Figura 1: Gel de agarosa al 2’5% teñido con bromuro de etidio. Se analiza, mediante PCR diferencial, la posible existencia de deleciones homocigóticas del exón 2 del gen PTEN en meduloblastomas, mediante densitometría comparativa de las bandas de PTEN (banda superior de 201 pb), frente a GAPDH (banda inferior de 160 pb). 1-3: DNA extraído a partir de sangre de donantes sanos (control negativo); 4-6: DNA extraído de muestras de meduloblastoma incluidas en parafina; 7: control negativo de la reacción de PCR (H2O). En la última calle se ha cargado un marcador de peso molecular (1 Kb). En la calle número 4 se observa una muestra que tras realizarse un análisis de densitometría presentaba deleción homocigótica del exón 2 del gen PTEN. Figura 2: Gel de agarosa al 2’5% teñido con bromuro de etidio. Se analiza, mediante PCR diferencial, la posible existencia de deleciones homocigóticas del exón 6 del gen PTEN en meduloblastomas, mediante densitometría comparativa de las bandas de PTEN (banda superior de 191 pb), frente a GAPDH (banda inferior de 160 pb). 1-4: DNA extraído a partir de sangre de donantes sanos (control negativo); 5: DNA extraído de una muestra de meduloblastoma incluida en parafina que tras analizarse mediante densitometría se vio que presentaba una deleción homocigótica del exón 6 del gen PTEN. En la primera calle se ha cargado un marcador de peso molecular (1 Kb).

 

Tabla 1: Resumen de los datos clinicopatológicos de 34 muestras de meduloblastoma/PNET y de los resultados obtenidos del análisis mediante PCR diferencial de las deleciones homocigóticas del exón 2  (E-2) y 6 (E-6) del gen PTEN y de seis fragmentos (74k, 36k, g14ext, g14, 60k y 101n) del gen DMBT1.
Figura 3: Geles de agarosa al 2’5% teñidos con bromuro de etidio. Se analiza, mediante PCR diferencial, la posible existencia de deleciones homocigóticas en seis áreas diferentes del gen DMBT1 en meduloblastomas. Blood: corresponde a DNA extraído de leucocitos de donantes sanos. MB4: un caso de meduloblastomas que presenta deleción homocigótica en las seis áreas de DMBT1 sometidas a estudio.


   

INTRODUCCIÓN
   
   Los genes recientemente descubiertos, PTEN y DMBT1 se encuentran situados en el cromosoma 10q. En concreto: PTEN en 10q23.3, y DMBT1 en 10q25.3-q26.1. Ambos son genes supresores de tumores que participan, entre otros, en la génesis de tumores cerebrales, como gliomas y tumores neuroectodermicos primitivos (PNETs). Los PNETs supratentoriales son similares morfológicamente a los infratentoriales (PNETs de tronco y meduloblastomas de cerebelo), pero muestran diferente comportamiento biológico, siendo, en general, los PNETs de cualquier localización más agresivos que los meduloblastomas cerebelosos. Ante la sospecha de que los PNETs supratentoriales y los meduloblastomas presenten diferencias genéticas específicas de grupo, que puedan ayudar a elegir un tratamiento más específico, hemos estudiado el patrón de deleciones homocigóticas de los genes PTEN y DMBT1 mediante PCR diferencial.
   

MATERIAL Y MÉTODOS
 
   El DNA sometido a estudio fue extraído de muestras incluidas en parafina correspondientes a 42 PNETs, de los cuales, 11 eran supratentoriales, y 31 infratentoriales (cerebelo). Mediante PCR diferencial se realizó el estudio de detección de deleciones homocigóticas en cada gen particular.
   

RESULTADOS


   Se detectaron deleciones de PTEN en 6 (19%) meduloblastomas y en ningún PNET supratentorial, así como deleciones de DMBT1 en 2 (6%) meduloblastomas y otros 2 (18%) PNETs supratentoriales. Tabla 1.
   

CONCLUSIONES
 
   Ante los resultados obtenidos parece que las deleciones de PTEN se asocian más frecuentemente a la génesis de meduloblastomas, mientras que las deleciones de DMBT1 se asocian al desarrollo de PNETs supratentoriales. Estos resultados se consideran preliminares y han de ser corroborados con series mayores de tumores y un análisis estadístico oportuno.
   

 

 NOTAS AL PIE DE PÁGINA
 
   Correspondencia: María del Mar Inda. Dep. de Genética, Universidad de Navarra. Pamplona, España. mailto:jscastresana@unav.es