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Peso de hipofisis y volumen nuclear de las células gonadotroficas en la rata macho alcoholica

Dra. Aymara Gómez González

Histologia
ICBP Victoria de Giron
146 3102 Playa
11400 Ciudad Habana

Cuba
 Resumen
INTRODUCCION: El alcoholismo crónico se relaciona con una mayor frecuencia de disfunciones sexuales en el sexo masculino y se asocia a una disminución de las concentraciones plasmáticas de gonadotrofinas hipofisiarias.

OBJETIVOS: Realizar el estudio ponderal de las hipófisis y la cariometría de las células gonadotróficas de ratas macho tratadas con alcohol durante 12 y 24 semanas.
MATERIAL Y METODOS: Se administró alcohol al 10% a dos grupos de ratas albinas Wistar machos de diez semanas: diez de los animales consumieron alcohol durante 12 semanas y otros diez siguieron el tratamiento por 24 semanas; los diez animales restantes constituyeron los controles (n=30). Al finalizar la experiencia se extrajeron las hipófisis y procesaron para visualizar al M.O. Se midió el volumen nuclear de las células gonadotróficas con ocular micrométrico de 7 X y los datos se procesaron mediante el programa computadorizado MFT. Para estudiar el efecto de la administración de alcohol y del tiempo sobre las variables "pesos de hipófisis" y "volumen nuclear de células gonadotróficas" se practicó un análisis de la varianza de dos vías que incluyó como efectos principales al tiempo y al alcoholismo anidado en el tiempo.
RESULTADOS: Se encontró disminución de los pesos de las hipófisis, y del volumen nuclear de dichas células. Al M.O las células gonadotróficas de ambos grupos mostraron vacuolización citoplasmática, la cual fue más marcada en los animales tratados con alcohol.
CONCLUSION: El consumo de alcohol al 10% durante 12 y 24 semanas provocó disminución del peso de las hipófisis y del volumen nuclear de células gonadotróficas en la rata albina macho y vacuolización citoplasmatica evidente en estas células. Estos resultados se asocian a la disminución de las concentraciones plasmáticas de gonadotrofinas reportadas en algunos pacientes alcohólicos.
 Introducción
En Cuba, el alcoholismo afecta principalmente a la población adulta masculina, en la que provoca diversos trastornos de tipo nervioso, cardiovascular, digestivo, metabólico y endocrino 1, 2, 3, 4, 5, 6. Entre éstos últimos se encuentran las disfunciones sexuales eréctiles y la infertilidad, que se asocian a la disminución de la concentración plasmática de testosterona presente en sujetos alcohólicos 6, 7, 8, 9, 10. Con relación a las hormonas gonadotróficas FSH y LH, algunos autores plantean su inhibición por parte del tóxico, tanto en la intoxicación crónica 6 , 11 como en la aguda, 9, 12, 13 mientras que otros refieren un incremento significativo de sus concentraciones plasmáticas en los alcohólicos crónicos 14, 15. No obstante las alteraciones que provoca el alcohol sobre dichas hormonas en la literatura consultada no se han reportado alteraciones morfológicas de las células gonadotróficas en tales casos; tampoco se han hallado referencias al análisis morfométrico de dichas células, lo cual podría aportar una información más objetiva sobre el estado del daño celular. Por ello, y dada la importancia clínica actual del alcoholismo es propósito del presente trabajo realizar el estudio ponderal de las hipófisis y la cariometría de las células gonadotróficas de ratas macho tratadas con alcohol durante varias semanas.
 Material y Métodos
Animales y tratamiento: 30 ratas albinas Wistar machos de 10 semanas de edad (170-215 g de peso corporal), provenientes del bioterio del ICBP "Victoria de Girón" fueron divididas en dos grupos de 15 animales, cada uno formado por diez experimentales y cinco controles, seleccionados al azar. Los animales fueron separados en cajas individuales; los experimentales recibieron alcohol etílico al 10 % en el agua de consumo 16 durante 12 y 24 semanas respectivamente y los controles recibieron agua ad libitum. El líquido se suministró en jeringuillas plásticas de 50 mL lo que permitió comprobar el consumo diario de la droga.
Procesamiento histológico y análisis morfométrico: Los animales fueron decapitados previa anestesia con pentobarbital sódico a la dosis de 40 mg/kg por vía intraperitoneal. Las hipófisis se extrajeron, pesaron en una balanza analítica BLA-2002-MT, fijaron por inmersión en Bouin durante 24 horas y procesaron mediante la técnica de la parafina. Los cortes a 6 µm se colorearon con paraldehído fuscina PAS orange G, que permitió identificar las células gonadotróficas y diferenciarlas de otras células basófilas de la hipófisis 17. Se realizó cariometría de las células gonadotróficas, utilizando ocular micrométrico 7X, objetivo de inmersión 100X y optovar 1.6, en el que una división de escala equivale a 1 µm. Se midieron los diámetros nucleares mayor y menor de más de 100 núcleos celulares que presentaron nucleolos manifiestos por cada animal y se calculó el volumen nuclear empleando el programa computadorizado MFT18.
Análisis de los datos y procesamiento estadístico: Las variables pesos de hipófisis y volumen nuclear de células gonadotróficas fueron almacenadas en bases de datos mediante el programa computadorizado Fox Pro 2.5. Para estudiar el efecto de la administración de alcohol y del tiempo sobre dichas variables se practicó un análisis de la varianza de dos vías que incluye como efectos principales al tiempo y al alcoholismo anidado en el tiempo. Este análisis se llevó a cabo mediante el programa comercial Systat 7.0.
 Resultados
El peso de las hipófisis y el volumen nuclear de las células gonadotróficas fueron menores en todas las ratas alcohólicas Fig_1 , aunque el análisis de la varianza aplicado a todos los grupos indicó que en ambas variables esta disminución no fue estadísticamente significativa. El estudio histológico de las células gonadotróficas reveló una discreta vacuolización citoplasmática tanto en los grupos controles como en los experimentales, pero en estos últimos fue más evidente. Fig_2 y Fig_3
Imagen de Peso de hipofisis y volumen nuclear de las células gonadotroficas en la rata macho alcoholicaZoom
Microfotografia de celulas gonadotroficas de una rata alcoholizada de 12 semanas. 1000 X
Imagen de Peso de hipofisis y volumen nuclear de las células gonadotroficas en la rata macho alcoholicaZoom
Microfotografia de celulas gonadotroficas de una rata alcoholizada de 24 semanas. 1000 X
 Discusión
La disminución de los pesos hipofisarios en las ratas tratadas puede atribuirse a la ingestión crónica del tóxico, ya que la no significación estadística pudiera explicarse por el menudo peso de este órgano (entre 8 y 10 mg en la rata) y el pequeño tamaño muestral. Aunque no se han encontrado referencias al comportamiento de los pesos de las hipófisis durante el alcoholismo crónico, sí se ha reportado disminución en el peso de otros órganos como los testículos, la próstata y las vesículas seminales19 que mantienen una relación funcional con esta glándula.
La disminución del volumen nuclear de las células secretoras se considera un signo de poca actividad de síntesis y secreción celular20 En este estudio la disminución del volumen nuclear de las células gonadotróficas en las ratas tratadas pudiera relacionarse con la disminución global del peso hipofisario y concuerda con el descenso de la concentración plasmática de hormonas gonadotróficas referido por otros autores6,9,11,12,13Por otra parte, la reducción del volumen nuclear se explica puesto que el núcleo controla los procesos de síntesis y secreción celular.
La vacuolización citoplasmática encontrada puede corresponderse con la distensiòn extrema de las cisternas del retículo endoplásmico rugoso que ha sido descrita en ratas castradas como consecuencia del aumento de su actividad de síntesis21. Si bien algunos autores plantean que el alcohol inhibe la síntesis y secreción de las células gonadotróficas,13 otros refieren una elevación de las concentraciones plasmáticas de FSH y LH en sujetos alcohólicos 14,15 secundaria a la disminución de testosterona, aunque en estos casos se acompañaría del aumento de su volumen nuclear 20 y no de su disminución, lo que no concuerda con los resultados del presente trabajo.
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