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Página Principal Comunicaciones	Imágenes citológicas de Helicobacter heilmannii (Gastrospirillum hominis). Bacteria gástrica no reportada en Cuba. Lic. Sara Hilda Mandado Pérez , Dr. Héctor Hernández Garcés , Dr. Felipe Piñol Jiménez , Dr. Carlos Dominguez Alvarez y Dr. Angel A. Escobedo Carbonel Departamento de Anatomía Patológica. Instituto Nacional de Gastroenterología. Calle 25 503, Municipio Plaza 10400 Ciudad Habana. Cuba
Subir Resumen Introducción Material y Métodos Discusión Bibliografia	Resumen Introducción Después del descubrimiento del Helicobacter pylori (bacteria gástrica, inicialmente nombrada Campylobacter pyloridis) los estudios microbiológicos y fundamentalmente de biología molecular permitieron el surgimiento de un nuevo género: Helicobacter. Hasta 1993 en este género se habían incluído 9 especies. Actualmente está constituído por más de 13 especies, agrupadas en gástricas y no gástricas. Las gástricas son productoras de ureasa. Estas bacterias infectan a diferentes vertebrados. En el hombre solamente se han reportado H.pylori, H heilmannii y H. felis, en orden de frecuencia, daño y cuantía H heilmanii y H.felis son bacterias cuyos hospederos habituales son los animales domésticos como perros y gatos, por lo que el hombre se infecta en el contacto diario con sus mascotas. A semejanza de H.pylori, H. heilmannii es capaz de producir gastritis y úlceras, pero la última es mas sensible a los antibióticos. A diferencia de H. pylori, las otras 2 especies gástricas reportadas en humanos no han podido ser cultivadas in vitro. En Cuba se conoce de los daños ocasionados por H. pylori en el hombre, la bacteria se asocia a gastritis, úlcera gastro duodenal y cáncer gástrico. Es necesario que se conozca la existencia de las otras especies que aunque menos frecuentes pudieran producir trastornos gástricos y dar una prueba ureasa positiva. Objetivo Reportar el hallazgo de Helicobacter heilmannii, bacteria gástrica no estudiada en Cuba. Materiales y métodos En un estudio morfológico de citología gástrica por cepillado, tomadas mediante endoscopías, en pacientes con gastritis y/o úlcera gástrica para diagnosticar H. pylori, las láminas fueron fijadas en etanol al 95% y coloreadas con Hematoxilina Eosina, azul de metileno al 2% con pH básico y Papanicolaou. Se realizó el estudio morfológico y morfométrico de las bacterias, cuyas imágenes fueron fotografiadas. Resultados En un paciente con úlcera gástrica la prueba de la ureasa fue positiva y la citología resultó negativa de H. pylori (de forma espiralada de 2.5 a 4 micras), mientras que se observaban otras bacterias espiraladas mas largas (entre 7 y 10 micras) con mayor número de espiras (entre 4 y 6) éstas mas comprimidas, que solamente se habían visto en referencias bibliográficas. Se informó Gastrospirillum hominis. El paciente recibió tratamiento con Q ulcer, metronidazol, tetraciclina y metoclopramida. A los 2 meses se finalizado el tratamiento se le repitió la endoscopía y había desaparecido la úlcera. Se informó entonces una gastritis crónica ligeramente agudizada. No existía reflujo biliar. La ureasa fue negativa y las bacterias descritas en la muestra anterior habían desaparecido. Conclusiones La citología gástrica por cepillado es un método morfológico útil para el diagnóstico del género Helicobacter.
Subir Resumen Introducción Material y Métodos Discusión Bibliografia	Introducción En las últimas 3 décadas los investigadores de todo el mundo han retomado el estudio de las bacterias espiraladas, que habían sido reportadas desde finales del siglo XIX en el estómago de algunos mamíferos.1-3 Las modernas técnicas de biología molecular han demostrado el parentesco de estas especies en su material genético4. También se han realizado estudios enzimáticos, immunológicos y morfológicos tanto en el microscopio óptico como el electrónico de trasmisión y barrido4-18. Los cultivos microbiológicos in vitro no siempre han sido posible por lo que ha sido necesario utilizar animales de experimentación.4 Con estos estudios ha surgido un nuevo género Helicobacter, en el cual hay incluidas hasta el momento más de 12 especies 4,12,15-22 Algunas de estas bacterias revisten gran importancia para la medicina humana, pues se ha demostrado su participación en la patogénesis de la gastritis, la úlcera gastroduodenal y en el cáncer gástrico en el hombre.1-8,10-17,19-20,23-32 El Instituto ha utilizado la citología gástrica por cepillado para el diagnóstico morfológico de H. pylori; por lo que se han estudiado los aspectos morfológicos de todas las especies del género. Dentro de este género existen 6 especies gástricas, de las cuales solo 3 han sido reportadas en humanos: H. pylori, H. heilmannii y H. felis.
Subir Resumen Introducción Material y Métodos Discusión Bibliografia	Material y Métodos PRESENTACIÓN DEL CASO. Paciente masculino, de 57 años de edad, operado de úlcera gastroduodenal mediante la técnica quirúrgica de Billroth II en otro centro hospitalario, presentaba síntomas dispépticos, y acudió al centro con epigastralgia, pirosis y vómitos biliosos; se le realizó endoscopia y se observaron una úlcera de boca anastomótica y gastritis crónica del muñón gástrico. Se realizó biopsia para la prueba de la ureasa y citología por cepillado para diagnosticar H. pylori; la ureasa fue positiva; la muestra fue fijada en alcohol de 95° y coloreada con diferentes coloraciones: safranina, Gram, azul de metileno al 2 % y Papanicolaou. La observación de las láminas se realizó primero con lentes de pequeño aumento para localizar el mucus y los grupos de células glandulares, después, se buscaron con lente de inmersión las bacterias espiraladas, de 2,5 a 4 m en forma de S correspondientes a H. pylori (Figuras 1 y 2), pero éstas no fueron encontradas en todo el extendido, sin embargo aparecían otras bacterias espiraladas, que solo se conocían por la literatura, cuyo número de espiras variaba entre 4 y 6 espiras, éstas más comprimidas, la longitud de la bacteria (de 7 a 10 µm) era mayor que H. pylori y aparecían en menor cuantía, se midieron y fotografiaron (Figuras 3 – 5). Se informó Gastrospirillum hominis. El paciente recibió tratamiento con Q-ulcer (1 g diario x 30 días), metronidazol (1 g diario x 14 días), tetraciclina (1 g diario x 14 dias) y metoclopramida (1 tableta de 10 mg antes de desayuno, almuerzo y comida) con gran mejoría clínica. Se le realizaron 2 endoscopias evolutivas. En la que se realizó a los 2 meses, finalizado el tratamiento, se constató que la úlcera había desaparecido y se informó: gastritis crónica ligeramente agudizada. No existía reflujo biliar. Se realizó biopsia y citología para H. pylori. La ureasa fue negativa y en el extendido citológico habían desaparecido las bacterias descritas en la muestra anterior, por lo que no se hizo biopsia para la búsqueda de la bacteria en el tejido. El paciente procedía de una zona rural, pero no fue posible conocer si había tenido contacto directo con animales. Zoom Fig. 1 Abundantes bacterias H pylori obtenidas de un cultivo. Gram x1200 Zoom Fig 2 Abundantes H pylori bordeando un grupo de células gástricas con algunos leucocitos. Azul de metileno al 2% x1200 Zoom Zoom Zoom
Subir Resumen Introducción Material y Métodos Discusión Bibliografia	Discusión DISCUSIÓN. En la actualidad existen diversos métodos diagnósticos,15,30-31 algunos muy específicos, que son trabajosos y muy costosos como los cultivos y las modernas técnicas de biología molecular; otros son rápidos y baratos como la prueba de la ureasa, pero ésta no es específica dentro del género, pues las 3 especies de Helicobacter que han sido halladas en el estómago humano son ureasa positivas.4 En este caso, con la prueba de la ureasa positiva se esperaba encontrar H. pylori; sin embargo, esta bacteria estaba ausente, solo se observaron nuevas bacterias espiraladas que se conocían por la literatura científica. Al realizar los estudios morfológicos y morfométricos se pudo comprobar que no se trataba de H. pylori, sino de otra bacteria del mismo género, H. heilmannii o H. felis, las cuales fueron informadas como Gastrospirillum hominis, después se identificaron con su nuevo nombre. Al microscopio óptico se observan semejanzas morfológicas entre H. heilmannii y H. felis; aunque esta última ha sido más rara en humanos.4 Al microscopio electrónico se pudiera establecer la distinción entre ambas especies, pero no fue posible realizar biopsia para este fin porque al repetir la endoscopia, ya el paciente había culminado el tratamiento, la prueba de la ureasa era negativa y las bacterias reportadas habían desaparecido en el extendido citológico. Está demostrada la participación de H. heilmannii en la patogénesis de la gastritis en humanos.1-3,6-8,10-14,17,19-28 Esta bacteria ha sido reportada en un paciente con cáncer gástrico.24 En este caso la bacteria se detectó en un paciente con úlcera de la neoboca, que respondió al tratamiento con la desaparición del microorganismo. En la endoscopia se observó su mejoría. Hasta el presente no se ha encontrado ningún reporte de H. heilmannii en muestras citológicas, solamente en biopsias. En Francia se reportan 4 casos en una serie de 1976 biopsias gástricas consecutivas,25donde se plantea que hasta 1990 habían sido reportados 37 casos infectados por Gastrospirillum hominis, lo cual implica que su frecuencia variaba entre 0,25 y 0,90 %. Más tarde, en 1994, se publica un trabajo realizado en Alemania,26 en el cual se reportan 125 casos con gastritis y la presencia de H. heilmannii en una serie de 25 000 biopsias gástricas consecutivas en un período de 4 años; se comprobó que 111 de esos pacientes convivían con animales domésticos. En Italia el primer reporte de esta bacteria fue en 1991 27 y en Japón, un país con tantos avances en el campo de la Gastroenterología, se publicó el primer caso en 1994 28 En un estudio realizado en Eslovenia, en 63 pacientes con úlcera gástrica crónica H. pylori +, en el cual se utilizó una triple terapia antibiótica, y se les siguió durante 2 a 4 años, mediante endoscopias, pruebas para organismos semejntes a Campylobacter (CLO tests) y biopsias para observar la mejoría histológica después de erradicada la bacteria, hubo reinfección por H. pylori e infección con H. heilmannii en 3 casos, cuyas imágenes en cortes histológicos coloreadas con la técnica de Warthin Starry son muy demostrativas 29. En Cuba llama la atención que, a pesar de que en los servicios de endoscopia se han hecho miles de biopsias gástricas desde hace más de 20 años, e incluso se han realizado estudios morfológicos minuciosos de la mucosa gástrica con lentes de inmersión en busca de H. pylori no se haya reportado esta bacteria. Aunque el hallazgo de H. heilmannii en este trabajo solo haya sido de 1 caso en 625 citologías y esta no haya sido reportada con anterioridad en la literatura mediante este método - diagnóstico, no significa que la Citología no sea eficiente para el diagnóstico de esta bacteria, de hecho en Cuba es el primer método diagnóstico que la detecta. Se debe tener en cuenta que es una bacteria poco frecuente, aparece en menor cuantía que H. pylori y habitualmente en los estudios citológicos e histopatológicos no se utiliza la lente de inmersión, al no ser en casos muy precisos. El único libro de Microbiología editado en Cuba que describe el género Helicobacter no menciona esta especie32. Es difícil encontrar lo que no se busca y mucho menos identificar algo que no se conoce. Es de suponer que si no se realizan estudios muy específicos, pueda estarse inculpando en ocasiones injustamente a H. pylori, pues todas estas bacterias son ureasa positivas. Por otra parte solo H. pylori logra ser cultivada in vitro. Por supuesto, a los efectos prácticos, no es necesario utilizar técnicas tan caras, pues estas bacterias responden por igual a los mismos tratamientos. Los autores consideran que éste es un problema conceptual y debe quedar esclarecido, porque en Cuba solo se conocen los daños ocasionados por H .pylori. Se Recomienda a los citólogos e histopatólogos tener en cuenta los aspectos morfológicos y morfométricos de esta bacteria para su diagnóstico citológico y en biopsias gástricas. Se hace necesario divulgar la forma de trasmisión de la bacteria para evitar que las personas que tienen contacto directo con animales domésticos se contagien, pues, aunque en Cuba este es el primer caso que se reporta y solo constituye un hallazgo, internacionalmente está demostrada la importancia de H. heilmannii en la patogénesis de la gastritis en humanos.
Subir Resumen Introducción Material y Métodos Discusión Bibliografia	Bibliografia REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 1. Rappin J. Contribution a` l 'etude de bactéries de la bouche a` l 'etat normal. In Breed R S, Murray EGD, Hitchins A, eds, Bergey's manual of determinative bacteriology. 6 ed. Baltimore: Williams and Wilkings, 1948. .p.68. 2. Bizzozero G. Über die schlauchförmigen Drüsen des Magen-Darm-Kanals und die Beziehung ihses Epithels zu dem Ober Flächenepithel der Schleimhaut. Arch Mikrobiol Anat 1893; 42: 82-152. 3. Salomon H. Über das Spirillum des Säugetiermagens und sein Verhalten zu den Belegzellen. Zentrabl Bakteriol (Naturwiss ) 1896; 19: 433- 41. 4. O' Rourke Lee A. Gastric bacteria other than Helicobacter pylori. Gastroenterol Clin Norh Am 1993; 22: 21- 42. 5. Lockard VG, Boler Rk . Ultrastructure of a spiral microorganism in the gastric mucosa of dogs. Am J Vet. 1970; 31: 1453-1462. 6. Dent JC, McNulthy CAM, Uff JC, Wilkinson SP, Gear MW. 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